本書主要介紹法醫(yī)物證檢驗(yàn)技術(shù)要求掌握、熟悉和了解的實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法,及部分最新的醫(yī)學(xué)法醫(yī)物證檢驗(yàn)技術(shù)進(jìn)展和拓展性實(shí)驗(yàn)。本書根據(jù)教學(xué)大綱要求,對(duì)每個(gè)實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)原理,試劑及配制方法,設(shè)備及材料準(zhǔn)備,實(shí)驗(yàn)操作步驟,實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)進(jìn)行介紹,同時(shí),對(duì)同類實(shí)驗(yàn)方法輔以實(shí)驗(yàn)方法評(píng)價(jià)及比較,每個(gè)實(shí)驗(yàn)后附實(shí)驗(yàn)報(bào)告書寫及實(shí)驗(yàn)小結(jié)要求。
童大躍,中山大學(xué)法醫(yī)物證教研室、中山大學(xué)法醫(yī)鑒定中心副主任技師、副主任法醫(yī)師,博士,研究方向?yàn)榉ㄡt(yī)遺傳學(xué)—核酸遺傳標(biāo)記多態(tài)性。發(fā)表論文70余篇,其中第一作者近50篇,含SCI收錄論文12篇。
第一章法醫(yī)物證實(shí)驗(yàn)室基本要素及要求
一、法醫(yī)物證實(shí)驗(yàn)室守則
二、法醫(yī)物證實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的要素及要求
三、法醫(yī)物證實(shí)驗(yàn)室設(shè)備配置要素及要求
四、法醫(yī)物證實(shí)驗(yàn)室設(shè)備購買、使用、維護(hù)及管理要求
五、法醫(yī)物證實(shí)驗(yàn)室水、電、氣及溫度、濕度等要求
六、法醫(yī)物證實(shí)驗(yàn)室試劑、耗材的配備與存放及試劑配制要求
七、法醫(yī)物證實(shí)驗(yàn)室生物安全要求
八、法醫(yī)物證實(shí)驗(yàn)室文獻(xiàn)、資料和檔案保存及管理要求
九、法醫(yī)物證實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可和資質(zhì)認(rèn)證的要素及要求
第二章法醫(yī)物證檢驗(yàn)檢材的勘查、發(fā)現(xiàn)、提取、包裝、保存和送檢
一、常見法醫(yī)物證檢驗(yàn)檢材的種類
二、常見法醫(yī)物證檢驗(yàn)檢材的特性
三、法醫(yī)物證檢材的勘查和發(fā)現(xiàn)
四、常規(guī)生物檢材的提取
五、法醫(yī)物證檢驗(yàn)檢材的包裝
六、法醫(yī)物證檢驗(yàn)檢材的保存
七、法醫(yī)物證檢驗(yàn)檢材的領(lǐng)用
八、法醫(yī)物證檢驗(yàn)檢材的送檢
九、法醫(yī)物證檢驗(yàn)檢材的受理
第三章法醫(yī)物證學(xué)DNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)
一、核酸分離和提純的一般原則
二、微量及特殊檢材DNA的提取及注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)一血痕(液)Chelex—100提取DNA法
實(shí)驗(yàn)二全血酚—氯仿提取DNA法
實(shí)驗(yàn)三精斑和混合斑的DNA提取
三、核酸定量分析及注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)四紫外分光光度定量法
實(shí)驗(yàn)五化學(xué)顯色定量法(選做)
實(shí)驗(yàn)六瓊脂糖凝膠電泳定量法
四、法醫(yī)DNA遺傳標(biāo)記的主要分析方法
實(shí)驗(yàn)七TPOX和TH01基因座PCR復(fù)合擴(kuò)增法
實(shí)驗(yàn)八聚丙烯酰胺凝膠電泳及銀染色法
實(shí)驗(yàn)九RFLP分析技術(shù)—Southern印跡法(選做)
實(shí)驗(yàn)十SNP分析技術(shù)(選做)
五、自動(dòng)化遺傳分析儀及復(fù)合擴(kuò)增技術(shù)
實(shí)驗(yàn)十一STR熒光復(fù)合擴(kuò)增試劑盒擴(kuò)增
實(shí)驗(yàn)十二3500XL遺傳分析儀(示教)
六、親子鑒定和個(gè)體識(shí)別的相關(guān)計(jì)算
實(shí)驗(yàn)十三親子鑒定試驗(yàn)及親權(quán)指數(shù)計(jì)算
實(shí)驗(yàn)十四個(gè)體識(shí)別試驗(yàn)及似然率計(jì)算
七、線粒體DNA多態(tài)性分析技術(shù)及注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)十五線粒體高變區(qū)擴(kuò)增及測(cè)序(選做)
第四章法醫(yī)物證常見斑痕及組織檢材的檢驗(yàn)
一、血痕檢驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)十六血痕預(yù)試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)十七血痕確證試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)十八血痕的種屬試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)十九紅細(xì)胞血型試驗(yàn)
二、精斑、陰道液和混合斑檢驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)二十精斑預(yù)試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)二十一精斑確證試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)二十二陰道液及其混合斑痕檢驗(yàn)(選做)
三、唾液和煙蒂檢驗(yàn)
四、骨骼、牙齒和指甲檢驗(yàn)
五、毛發(fā)和皮膚等軟組織檢驗(yàn)
六、其他體液(膿液、鼻涕、痰液、尿液和糞便)檢驗(yàn)
第五章DNA數(shù)據(jù)庫及其法醫(yī)學(xué)應(yīng)用技術(shù)
一、國外DNA數(shù)據(jù)庫介紹
二、中國DNA數(shù)據(jù)庫介紹
三、DNA數(shù)據(jù)庫的組成與功能
四、DNA數(shù)據(jù)的建立
五、DNA數(shù)據(jù)比對(duì)
六、DNA數(shù)據(jù)庫質(zhì)量控制
買驗(yàn)二十三數(shù)據(jù)庫使用練習(xí)
第六章法醫(yī)物證學(xué)新技術(shù)和實(shí)驗(yàn)介紹
一、RNA多態(tài)性及分析技術(shù)
實(shí)驗(yàn)二十四RNA提取及定量(選做)
實(shí)驗(yàn)二十五TaqMan探針實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(選做)
二、激光捕獲顯微切割技術(shù)
三、變性一高效液相色譜分析技術(shù)
實(shí)驗(yàn)二十六DHPLC使用示教
四、質(zhì)譜分析技術(shù)
實(shí)驗(yàn)二十七M(jìn)ALDI—TOF質(zhì)譜示教
五、表觀遺傳學(xué)與法醫(yī)學(xué)
附錄
附錄一法醫(yī)物證學(xué)課程教學(xué)大綱
附錄二常用STR基因座和線粒體高變區(qū)擴(kuò)增用引物序列
附錄三法醫(yī)學(xué)物證實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制
附錄四重要的法醫(yī)物證學(xué)參數(shù)
附錄五實(shí)驗(yàn)報(bào)告(格式)
參考文獻(xiàn)
第二步,提取前一定要拍照固定。照相甚至錄像固定提取過程十分重要。留下痕量檢材的客體位置,擦拭客體的具體部位都涉及物證的證據(jù)力。如在室內(nèi)盜竊中心現(xiàn)場(chǎng),門外、樓外發(fā)現(xiàn)提取的撬門工具上檢出某個(gè)個(gè)體DNA成分,證據(jù)力顯然不同。如沒有拍照固定,一旦發(fā)生質(zhì)疑,該檢驗(yàn)結(jié)果的價(jià)值就很難斷定。
第三步,及時(shí)提取。一旦發(fā)現(xiàn)或分析到可能對(duì)揭示案件、事件性質(zhì)或案件、事件發(fā)生過程有作用的微量檢材,必須立即提取,即在客體移位前就應(yīng)提取其表面微量檢材或整體提取客體。根據(jù)載體質(zhì)地、檢材的不同情況。在分析細(xì)胞最可能存在客體什么部位的基礎(chǔ)上,對(duì)重點(diǎn)部位采取擦拭、吸附、黏附、剪取等方法進(jìn)行富集。
擦拭法適合非滲透性客體,尤其是表面光滑的非滲透性客體。采取擦拭時(shí),擦拭物的體積不宜過大。擦拭物可直接放入離心管,盡快提取DNA模板。
黏附法適合面積較大的非滲透性客體。市場(chǎng)上銷售的生物檢材黏附柱對(duì)平面客體效果較好。而對(duì)于經(jīng)常接觸體表的衣物、飾物等客體的重點(diǎn)部位,如衣領(lǐng)、袖口、眼鏡的鼻托、梳齒間等用膠帶粘取法效果較好;受害人衣物懷疑被嫌疑人接觸過的重點(diǎn)部位也可用膠帶粘取法。黏附部位和面積應(yīng)根據(jù)具體情況操作。
吸附法適合可能附有人體細(xì)胞的物品,包括棉衣、棉被、毛巾、衣帽、手套等比較干凈、沒有沾染血跡的物品。吸附的部位和面積應(yīng)根據(jù)具體情況選擇。
疑有血跡、精液、唾液等斑跡的衣物類、紙類客體,應(yīng)用直接剪取法提取,沒有血跡的空白部位可用黏附或吸附法。
下面對(duì)一些具體檢材作進(jìn)一步說明:
。1)避孕套內(nèi)外面須分別提取。通常先提取套內(nèi)液體,再擦拭套外成分。套外成分可檢出自女性陰道或嫌疑人口腔脫落細(xì)胞,證據(jù)力顯然比單獨(dú)檢出套內(nèi)精液成分要大得多。
(2)致死物、致傷物必須分析嫌疑人及被害人接觸部位,分別提取。如刀身、刀柄部位、錘頭、錘把著力部位均須分別擦拭。
(3)疑有脫落細(xì)胞的瓶口、杯口用純水濕潤(rùn)的棉紗線3~8cm纏繞在經(jīng)高壓滅菌的無齒鑷子尖部,擦拭提取。紗線放入Eppendorf管(EP管)離心富集。還可從距瓶口、杯緣2~3cm處將瓶口、杯緣剪下送檢。
。4)粗的麻繩可真空吸取繩結(jié)及繩頭部位,較細(xì)的線繩、塑料繩、尼龍繩可剪取繩結(jié)和繩頭。
……