本書將基因工程實驗操作指導分為植物篇和動物篇兩部分,具體來說,植物轉(zhuǎn)基因部分包括了雙子葉模式植物擬南芥經(jīng)典的浸花法轉(zhuǎn)基因、單子葉農(nóng)作物大麥根癌農(nóng)桿菌介導的轉(zhuǎn)基因以及藥用植物三葉青發(fā)根農(nóng)桿菌介導的轉(zhuǎn)基因,動物轉(zhuǎn)基因部分包括了動物培養(yǎng)細胞的轉(zhuǎn)基因和模式動物斑馬魚的轉(zhuǎn)基因,各為一章,每章又分成若干個系列實驗。
本實驗指導適合生物技術(shù)、生物科學、基礎醫(yī)學、生物醫(yī)藥等專業(yè)方向的本科生、研究生以及相關(guān)科研人員使用。
前言
植物篇
第一章 擬南芥功能基因的克隆以及浸花法轉(zhuǎn)基因
第一節(jié) 擬南芥轉(zhuǎn)錄因子bHLH基因克隆系列實驗
第二節(jié) 擬南芥浸花法轉(zhuǎn)基因系列實驗
第三節(jié) 擬南芥35S:: AIRSLA: GFP純合子的篩選和分子鑒定系列實驗
第二章 大麥功能基因的克隆及根癌農(nóng)桿菌介導的植物轉(zhuǎn)基因
第一節(jié) 大麥HPT基因的克隆和表達載體構(gòu)建系列實驗
第二節(jié) 根癌農(nóng)桿菌介導的大麥轉(zhuǎn)基因系列實驗
第三節(jié) 大麥轉(zhuǎn)HPT基因后代的鑒定和分析系列實驗
第三章 三葉青功能基因的克隆以及發(fā)根農(nóng)桿菌介導的植物轉(zhuǎn)基因
第一節(jié) 三葉青肌動蛋白基因的克隆系列實驗
第二節(jié) 發(fā)根農(nóng)桿菌介導三葉青轉(zhuǎn)基因毛狀根的誘導和繁殖系列實驗
第三節(jié) 三葉青轉(zhuǎn)gfp基因毛狀根鑒定和分析的系列實驗
動物篇
第四章 基因工程改造哺乳動物細胞
第一節(jié) 轉(zhuǎn)基因動物的檢測系列實驗
第二節(jié) 小鼠肌肉組織cDNA文庫的構(gòu)建
第三節(jié) 鼠源基因ACTA1轉(zhuǎn)基因表達載體構(gòu)建的系列實驗
第四節(jié) 人胚腎細胞HEK293轉(zhuǎn)鼠源基因ACTA1及Western Blot驗證
第五章 斑馬魚功能基因的克隆和轉(zhuǎn)基因及其分析鑒定
第一節(jié) 斑馬魚laccl基因的克隆系列實驗
第二節(jié) MO對zmizla基因表達下調(diào)的作用分析系列實驗
第三節(jié) 斑馬魚lrrk2WD40-/-突變基因型鑒定系列實驗
第四節(jié) 斑馬魚行為軌跡跟蹤系列實驗
附錄 實驗室安全基本準則