生物化學實驗(第三版)分九章,共50個實驗項目,包括糖類物質(zhì)的檢測與分析、脂類物質(zhì)的檢測與分析、氨基酸的檢測與分析、蛋白質(zhì)的分離制備與分析、酶的分離制備與分析、維生素的檢測分析、核酸的分離與分析、綜合性與設計性實驗等常用生物化學實驗內(nèi)容。另外還介紹了生物化學實驗的基本知識與基礎技能,并在*后附上生物化學實驗中常用參數(shù),供實驗中參考。 本書適合作為普通高等院校各類理工科專業(yè)的生物化學實驗課教材或參考書。
針對性強;實用,成熟;將新工科等及有關認證新理念和課程思政元素融入有關教材中,加入二維碼,紙數(shù)結合。
黨的二十大報告指出教育、科技、人才是全面建設社會主義現(xiàn)代化國家的基礎性、戰(zhàn)略性支撐,將實施科教興國戰(zhàn)略擺在了推動現(xiàn)代化強國建設和實現(xiàn)民族復興的重要位置。生命科學在戰(zhàn)略新興產(chǎn)業(yè)和未來產(chǎn)業(yè)中占據(jù)著非常重要的位置。 自本書上一版發(fā)行以來,已經(jīng)過去十一年。在此期間,生物化學研究技術不斷進步,教學方式也發(fā)生了很大變化,在線課程和混合式教學方式大量應用,要求教材適應新的變化,跟上時代步伐,在內(nèi)容組織和形式上作出相應改變。 本書在第二版基礎上修訂而成。本次修訂過程中,根據(jù)各高校實驗開設情況和社會需求進行了實驗項目調(diào)整,保留了上一版中的43項實驗,新增了7個對生產(chǎn)應用和研究檢測有幫助的實驗,合計呈現(xiàn)了50個實驗項目。部分使用率不高的實驗從紙質(zhì)教材中刪除,但仍然以二維碼的方式放在教材數(shù)字化內(nèi)容平臺,以備需要時參考。實驗目的與要求采用可觀測的行為動詞表述,并融入課程思政內(nèi)容。本著學以致用的原則,每個實驗項目都進一步說明了實驗的應用價值。教材以二維碼的形式進行了知識擴展。 本書由曾萬勇、王永澤、史振平主編。編寫人員及分工如下:武漢輕工大學曾萬勇負責第一章、實驗2、實驗12,劉志國負責實驗14、實驗22,王麗梅負責實驗23、實驗29,閆達中負責實驗4、實驗8、實驗42、實驗47,林紅負責實驗20、實驗35;湖北工業(yè)大學王永澤、李欣、吳正奇、徐寧負責實驗13、實驗21、實驗31、實驗34;三峽大學何正權、黃權軍負責實驗3、實驗9、實驗30、實驗43;信陽農(nóng)林學院王欣負責實驗5、實驗15,徐源負責實驗6、實驗7,王澤夏負責實驗1、實驗27;成都大學何鋼負責實驗37、實驗38;陜西科技大學薛海燕負責實驗24、實驗25;武漢生物工程學院王靜、呂凱、夏光輝負責實驗10、實驗26、實驗46;青島科技大學史振平、李紅芳負責實驗28、實驗41、實驗44;武漢設計工程學院李嬋娟和農(nóng)筱藝負責實驗36、實驗39、實驗40、實驗49、實驗50;大連工業(yè)大學劉玉欣、李蓉負責實驗11、實驗18、實驗19、實驗45、實驗48;邵陽學院尹樂斌、伍強、翟中英負責實驗16、實驗17、實驗32、實驗33。曾萬勇負責統(tǒng)稿。 本次修訂時,上一版作者中有部分已經(jīng)退休或者不再從事生物化學實驗教學工作,誠摯感謝他們在前面編寫工作中奠定的基礎和作出的貢獻。 由于時間倉促以及編者水平有限,書中不足之處在所難免,請大家多提寶貴意見,以便我們今后進一步完善。
曾萬勇,男,博士,1996年畢業(yè)于西南師范大學生物系本科,獲理學學士,1999年畢業(yè)于中國科學院成都生物研究所,獲理學碩士學位,2002年畢業(yè)于四川農(nóng)業(yè)大學,獲農(nóng)學博士業(yè)學位。雜攻讀碩士學位期間專業(yè)為植物生物技術,主要從事植物細胞和分子遺傳學方面的研究,研究內(nèi)容為水稻分子遺傳學,構建了水稻雄性不育恢復基因的近等基因系并進行了分子評價。攻讀博士學位期間,主要從事植物遺傳學和基因組學研究。曾參與中國超級雜交水稻基因組計劃。畢業(yè)后主要從事植物生物技術研究,曾在泰國正大集團正大生物科學(武漢)研究院生物技術中心任中心主任職,主要負責植物細胞工程和植物分子生物學研究,曾負責并參與了馬鈴薯脫毒和快速繁殖研究,蘭花快速繁殖研究,水稻和玉米組織培養(yǎng)和轉基因體系構建。2006年進入武漢工業(yè)學院生物與制藥工程系工作,擔任生物化學、遺傳學、細胞工程、生物安全等課程教學工作。目前主要從事植物細胞工程研究,開展經(jīng)濟植物組織培養(yǎng)、快速繁殖和脫毒技術研究,中草藥資源快速繁殖,瀕危中草藥資源的挽救,通過植物生物反應器生產(chǎn)現(xiàn)代中藥活性成分研究,中藥轉基因體系構建和種質(zhì)創(chuàng)新,資源植物遺傳多樣性評價及優(yōu)良種質(zhì)資源選育等工作。曾參與乳制品中三聚氰胺的快速檢測與試劑、油菜QM基因克隆與功能分析等項目。目前承擔校級科研項目一項、橫向項目兩項、教學項目一項。本人參與的相關研究已經(jīng)發(fā)表論文7篇
目錄第一章實驗基本知識與基礎技能(1)第一節(jié)生物化學實驗室規(guī)則(1)第二節(jié)實驗室安全和防護知識(2)第三節(jié)基礎實驗操作技能(6)第四節(jié)實驗誤差與提高實驗準確度的方法(40)第五節(jié)實驗記錄與實驗報告(45)第二章糖類物質(zhì)的檢測與分析(49)實驗1糖的呈色反應和還原糖的檢驗(49)實驗2苯酚硫酸法測定總糖濃度(51)實驗3還原糖的測定3,5二硝基水楊酸比色法(54)實驗4粗淀粉的測定1%鹽酸旋光法(56)實驗5血糖的測定磷鉬酸比色法(59)實驗6可溶性糖的硅膠G 薄層層析(61)實驗項目拓展(64)第三章脂類物質(zhì)的檢測與分析(65)實驗7粗脂肪含量的測定索氏抽提法(65)實驗8油脂皂化與皂化值的測定(67)實驗9碘值的測定韋氏法(68)實驗10血清膽固醇的測定化學比色法(70)實驗11卵磷脂的提取與鑒定(72)實驗項目拓展(74)第四章氨基酸的檢測與分析(75)實驗12紙層析法分離鑒定氨基酸(75)實驗13甲醛滴定法測定氨基氮含量 (77)實驗項目拓展(79)第五章蛋白質(zhì)的分離制備與分析(80)實驗14蛋白質(zhì)的兩性反應與等電點的測定(80)實驗15蛋白質(zhì)的沉淀反應和顏色反應(82)實驗16蛋白質(zhì)含量測定(一)微量凱氏定氮法(MicroKjeldahl法)(87)實驗17蛋白質(zhì)含量測定(二)(91)Ⅰ雙縮脲法(Biuret法)(91)Ⅱ考馬斯亮藍G250法(Bradford法)(93)ⅢFolin酚試劑法(Lowry法)(95)ⅣBCA法(98)Ⅴ紫外(UV)吸收測定法(99)實驗18酪蛋白的制備(102)實驗19凝膠層析法分離蛋白質(zhì)(104)實驗20血紅蛋白的凝膠過濾(106)實驗21蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的測定SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法(109)實驗22血清蛋白質(zhì)乙酸纖維素薄膜電泳(117)第六章酶的分離制備與分析(121)實驗23酶的特性底物專一性(121)實驗24pH值對酶活性的影響(123)實驗25溫度對酶活性的影響(124)實驗26血清谷丙轉氨酶(ALT)活性的測定(126)實驗27大麥萌發(fā)前后淀粉酶活性的測定(128)實驗項目拓展(131)第七章維生素的檢測分析(132)實驗28植物中抗壞血酸含量的測定(132)實驗項目拓展(133)第八章核酸的分離與分析(134)實驗29植物基因組DNA的提取(134)實驗30酵母RNA的分離與組分鑒定(136)實驗31核苷酸的紙電泳(139)實驗32紫外分光光度法測定核酸的含量(140)實驗33RNA與DNA的測定(143)實驗34定磷法測定核酸含量(145)實驗35DNA的瓊脂糖凝膠電泳(148)實驗36質(zhì)粒DNA的微量制備堿裂解法、煮沸法(151)實驗37質(zhì)粒DNA的酶切鑒定及瓊脂糖凝膠電泳(156)實驗38質(zhì)粒DNA的大量制備與純化(159)實驗39大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備與轉化(162)實驗40PCR基因擴增(167)實驗項目拓展(169)第九章綜合性與設計性實驗 (170)實驗41雞蛋中卵清蛋白的提取和定量測定(170)實驗42纖維素酶活性測定及pH值對其活性的影響(172)實驗43酵母蔗糖酶的純化及性質(zhì)研究(176)Ⅰ酵母蔗糖酶的提取與純化(176)Ⅱ蔗糖酶Km值測定及脲的抑制作用(178)ⅢpH值對酶活性的影響和*適pH值的測定(182)Ⅳ溫度對酶活性的影響和反應活化能的測定(185)實驗44正交法測定幾種因素對酶活性的影響(187)實驗45固定化酵母細胞及蔗糖酶活性的檢測(191)實驗46溫度、pH值、激活劑和抑制劑對唾液淀粉酶活性的影響(193)實驗47溶菌酶結晶的制備及活性測定(196)實驗48橘皮果膠的提取及果凍的制備(200)實驗49蛋白質(zhì)免疫印跡雜交實驗(202)實驗50DNA片段的體外重組(205)實驗項目拓展(207)附錄實驗室中常用參數(shù)(208)參考文獻(209)