本書內容包括臨床分子生物學檢驗實驗室規(guī)則及常用儀器、臨床分子生物學檢驗基本技術和臨床分子生物學檢驗技術綜合實驗內容,并將常用試劑和緩沖液的配置作為附錄。在保留上一版特色的基礎上,秉持繼承、發(fā)揚、創(chuàng)新的精神,堅持實驗內容和專業(yè)知識的掛鉤,做到理論聯系實際,注重基礎和臨床的結合,既突出實用性和可操作性,又兼顧拓展性和創(chuàng)新性。文末附錄常用試劑和緩沖液配置,方便教學使用。內容包括各章學習目標、重點和難點內容,滿足學生復習、理解并扎實掌握所學知識。
第一章 臨床分子生物學檢驗實驗室規(guī)則及常用儀器/1
第一節(jié) 臨床分子生物學檢驗實驗守則 / 1
第二節(jié) 臨床分子生物學檢驗實驗室安全管理制度 / 3
第三節(jié) 臨床分子生物學檢驗實驗室安全應急預案 / 4
第四節(jié) 臨床分子生物學檢驗實驗室常用儀器介紹 / 5
第二章 臨床分子生物學檢驗基本技術/9
第一節(jié) 核酸的分離、純化與鑒定技術 / 9
實驗一 基因組DNA 的分離與純化/ 9
實驗二 RNA 的分離與純化/ 13
實驗三 質粒DNA 的提取與純化/ 17
實驗四 核酸的鑒定與分析 / 19
第二節(jié) 核酸擴增技術 / 29
實驗五 PCR 技術 / 29
實驗六 RT-PCR 技術 / 33
實驗七 熒光定量PCR 技術 / 37
第三節(jié) 核酸分子雜交及芯片技術 / 41
實驗八 DNA 分子雜交 / 42
實驗九 RNA 分子雜交/ 45
實驗十 熒光原位雜交 / 48
實驗十一 DNA 芯片技術 / 51
第四節(jié) 核酸測序及生物信息學分析技術 / 54
實驗十二 雙脫氧鏈終止測序法 / 54
實驗十三 高通量測序法 / 58
實驗十四 測序數據的比對分析 / 61
實驗十五 基因功能與通路分析 / 64
第五節(jié) 重組DNA 技術 / 66
實驗十六 DNA 的限制性核酸內切酶酶切反應 / 67
實驗十七 DNA 片段的回收 / 69
實驗十八 DNA 的重組連接 / 70
實驗十九 感受態(tài)細胞的制備及重組子轉化 / 72
實驗二十 重組子的篩選與鑒定 / 75
第六節(jié) 蛋白質組學研究技術 / 81
實驗二十一 雙向凝膠電泳技術 / 81
實驗二十二 蛋白質印跡技術 / 86
第三章 臨床分子生物學檢驗綜合性實驗/92
第一節(jié) 感染性疾病的分子生物學檢驗 / 92
實驗二十三 甲、乙型流感病毒核酸檢測 / 92
實驗二十四 結核分枝桿菌核酸檢測 / 95
實驗二十五 人乳頭瘤病毒基因分型檢測 / 97
實驗二十六 丙型肝炎病毒基因分型檢測 / 101
第二節(jié) 遺傳性疾病的分子生物學檢驗 / 104
實驗二十七 地中海貧血致病基因檢測 / 104
實驗二十八 進行性假肥大性肌營養(yǎng)不良相關基因檢測 / 110
實驗二十九 遺傳性耳聾相關基因檢測 / 113
第三節(jié) 腫瘤的分子生物學檢驗 / 116
實驗三十 白血病融合基因BCR-ABL 檢測 / 116
實驗三十一 人表皮生長因子受體-2 基因檢測 / 119
實驗三十二 表皮生長因子受體基因(EGFR)突變檢測 / 122
第四節(jié) 藥物代謝及個體識別的分子生物學檢驗 / 126
實驗三十三 華法林代謝酶基因檢測 / 126
實驗三十四 葉酸代謝酶基因檢測 / 129
實驗三十五 HLA 基因分型檢測 / 132
第四章 臨床分子生物學檢驗創(chuàng)新設計性實驗/ 136
實驗三十六 乙型肝炎病毒DNA 檢測標準品的制備/ 136
實驗三十七 熒光定量PCR 高分辨率熔解曲線分析檢測基因點突變 / 138
實驗三十八 線粒體DNA 的異質性突變檢測/ 139
實驗三十九 肺癌液體活檢 / 140
實驗四十 宏基因組測序用于難治性感染的檢測 / 142
附錄 臨床分子生物學檢驗技術實驗常用緩沖液與試劑的配制/ 144