“生化分析技術實驗”教材是與其理論課“生化分析原理及技術”相應配套的實踐性教學教材,可應用于生物化學課程群中的生化技術類實驗教學課程。本實驗教材內容為整個生命科學教學體系中最為基本、普遍且為學生要求掌握的相關生化分析技術實驗,其主要內容是對蛋白質等生物分子的分離純化、分析鑒定,并結合了當前有關的蛋白質組學技術,另外,也增加了部分實用的綜合型實驗內容。實驗內容具有代表性、實用性和先進性,是根據(jù)多年來的教學積累并結合當前相關科研需要所編選的。生命科學類的學生通過本教材實驗課的學習,能夠掌握當前在生命科學研究、應用和生產(chǎn)領域內對天然以及基因重組生物分子的分離、純化、制備、分析、鑒定、數(shù)據(jù)處理等多方面的生化分析技術方法、實驗原理、實驗設計、操作技術以及相關生化儀器(如紫外分光光度計、層析及色譜工作站系統(tǒng)、電泳系統(tǒng)、圖象分析系統(tǒng)、酶標儀等)的使用。
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目錄
叢書序
叢書前言
前言
一 基礎實驗部分
實驗1 紫外分光光度法(測定蛋白質吸收光譜曲線及含量) 3
實驗2 熒光光度測定法(測定核黃素含量) 7
實驗3 離子交換層析(分離氨基酸) 11
實驗4 凝膠層析(分離蛋白質及相對分子質量測定) 17
實驗5 DEAEG纖維素梯度洗脫層析 23
實驗6 疏水層析 29
實驗7 親和層析分離純化胰蛋白酶(環(huán)氧氯丙烷活化法) 34
實驗8 金屬螯合層析 40
實驗9 反相層析 45
實驗10 聚焦層析 50
實驗11 吸附層析(羥基磷灰石柱層析分離純化DNA) 58
實驗12 單向火箭免疫電泳 63
實驗13 聚丙烯酰胺凝膠垂直平板電泳 68
實驗14 SDSG聚丙烯酰胺凝膠垂直平板電泳(不連續(xù)體系) 75
實驗15 TricineGSDSG聚丙烯酰胺凝膠電泳(分離小分子多肽) 83
實驗16 管式凝膠等電聚焦 91
實驗17 水平平板凝膠等電聚焦 98
實驗18 潛水式瓊脂糖凝膠電泳 106
實驗19 印跡轉移電泳 112
實驗20 酶聯(lián)免疫吸附測定 121
二 綜合實驗部分
實驗21 蔗糖酶的綜合分離純化及其性質鑒定 133
實驗22 親和層析分離純化尿激酶及其性質鑒定(溴化氰活化法) 147
實驗23 雙向電泳(雙向電泳比較FADD和FADD-/-細胞株的蛋白質表達差異) 156
實驗24 基因融合蛋白質的純化 174
三 附錄
附錄A 聚丙烯酰胺凝膠電泳的蛋白質銀染色法 185
附錄B 常用緩沖液的配制方法 188
附錄C 常用數(shù)據(jù) 196
主要參考文獻 222